Datblygu dull anuniongyrchol ELISA ar gyfer canfod gwrthgorff IgG syndrom dolur rhydd acíwt y mochyn yn seiliedig ar brotein pigyn ailgyfunol

Mae Coronafeirws Syndrom Dolur Rhydd Acíwt Moch (SADS-CoV) yn coronafirws pathogenig enterig mochyn moch sydd newydd ei ddarganfod a all achosi dolur rhydd dyfrllyd mewn perchyll newydd-anedig ac achosi colledion economaidd sylweddol i'r diwydiant moch.Ar hyn o bryd, nid oes dull serolegol addas i werthuso effeithiolrwydd haint a brechlyn SADS-CoV, felly mae angen defnyddio assay immunosorbent sy'n gysylltiedig ag ensymau (ELISA) ar fyrder i wneud iawn am y diffyg hwn.Yma, adeiladwyd plasmid ailgyfunol yn mynegi protein pigyn SADS-CoV (S) wedi'i asio â pharth IgG Fc dynol i gynhyrchu bacwlovirws ailgyfunol a'i fynegi mewn celloedd HEK 293F.Mae'r protein S-Fc yn cael ei buro â resin protein G ac mae'n cadw'r adweithedd â gwrthgyrff Fc gwrth-ddynol a gwrth-SADS-CoV.Yna defnyddiwyd protein S-Fc i ddatblygu ELISA anuniongyrchol (S-iELISA) a gwneud y gorau o amodau adwaith S-iELISA.O ganlyniad, trwy ddadansoddi gwerth OD450nm o sera negyddol 40 SADS-CoV a gadarnhawyd gan assay immunofluorescence (IFA) a blotio Gorllewinol, penderfynwyd mai'r gwerth terfyn oedd 0.3711.Roedd cyfernod amrywiad (CV) y 6 sera positif SADS-CoV o fewn a rhwng rhediadau o S-iELISA i gyd yn llai na 10%.Dangosodd y prawf traws-adweithedd nad oes gan S-iELISA unrhyw groes-adweithedd â sera firws mochyn arall.Yn ogystal, yn seiliedig ar ganfod 111 o samplau serwm clinigol, cyfradd cyd-ddigwyddiad cyffredinol IFA a S-iELISA oedd 97.3%.Dangosodd y prawf niwtraliad firws gyda 7 o wahanol werthoedd OD450nm o serwm fod y gwerth OD450nm a ganfuwyd gan S-iELISA wedi'i gydberthyn yn gadarnhaol â'r prawf niwtraliad firws.Yn olaf, perfformiwyd S-iELISA ar samplau serwm fferm moch 300.Dangosodd citiau masnachol enterovirysau moch eraill mai cyfraddau positif IgG o SADS-CoV, TGEV, PDCoV a PEDV oedd 81.7%, 54%, a 65.3%, yn y drefn honno., 6%, yn y drefn honno.Mae'r canlyniadau'n dangos bod y S-iELISA yn benodol, yn sensitif, ac yn atgenhedladwy, a gellir ei ddefnyddio i ganfod haint SADS-CoV yn y diwydiant moch.Mae'r erthygl hon wedi'i diogelu gan hawlfraint.cedwir pob hawl.


Amser postio: Mehefin-22-2021